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核酸适配体亲和色谱的研究进展

赵强 , 乐晓春

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.05.006

核酸适配体亲和色谱是将核酸适配体作为色谱固定相上的亲和配体的一种新型色谱技术.核酸适配体是一种可以特异性地识别目标物的寡聚核苷酸,与免疫抗体相比,核酸适配体在筛选制备、稳定性及应用等方面都显示出独特的优点.本文介绍了核酸适配体亲和色谱在小分子、蛋白质和细胞的分离和分析中的应用,对核酸适配体亲和色谱的研究现状和发展前景进行了综述.

关键词: 核酸适配体 , 亲和色谱 , 小分子物质 , 蛋白质 , 细胞 , 分离 , 检测 , 综述

肽段反相色谱保留时间预测算法及其在蛋白质鉴定中的应用

刘超 , 王海鹏 , 付岩 , 袁作飞 , 迟浩 , 王乐珩 , 孙瑞祥 , 贺思敏

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00529

液相色谱-质谱(LC-MS)联用是当今规模化蛋白质鉴定的主流技术.肽段在反相液相色谱(RPLC)中的保留时间主要是由肽段的理化性质和LC条件(固定相、流动相)决定的.可以通过分析肽段的理化性质,并量化它们对肽段色谱行为的影响来预测保留时间.预测结果可以用于帮助提高蛋白质鉴定的数量和可信度,也可用于肽段的翻译后修饰等研究.现在已有的保留时间预测算法主要有保留系数法和机器学习法两大类,得到的预测保留时间与实际保留时间相关系数可达到0.93.随着色谱和质谱技术的不断发展,肽段色谱行为的稳定性和重现性越来越好,保留时间预测结果也越来越准确.预测肽段保留时间将成为提高蛋白质鉴定结果的重要技术手段之一.

关键词: 反相液相色谱-质谱联用 , 保留系数 , 机器学习 , 保留时间 , 预测 , 蛋白质 , , 鉴定

基于电迁移的蛋白质制备技术和方法新进展

郝斐然 , 付斌 , 张养军 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2015.09010

基于电迁移的蛋白质制备技术是对一类分离和制备技术的统称,其特征是在电场的作用下对目标物质进行分离和纯化制备,这种技术在生物大分子和蛋白质组的研究中应用广泛。基于电迁移的制备技术主要包括制备型电泳、制备型电色谱、制备型等电聚焦和自由流电泳等。本文对每种制备型电迁移装置的设计、特点和基于该种装置的各种应用方法的优缺点进行了详细阐述,并列举了一些实例。另外,微量级制备型电泳因分离度高、回收率高以及高效快速的优点,在微量级生物样本分析中发挥着日益重要的作用,近年来备受关注,本文也着重关注了这方面的进展,并对基于电迁移的制备技术做了展望。

关键词: 电迁移制备技术 , 制备型电泳 , 制备型电色谱 , 制备型等电聚焦 , 自由流电泳 , 微量级制备型电泳 , 蛋白质 , 综述

高分子专利

高分子材料科学与工程

专利名称:谷类蛋白质/纳米粒子原位复合材料及制备方法 专利申请号:CN200710070125.1

关键词: 专利名称 , 高分子 , 原位复合材料 , 专利申请号 , 制备方法 , 纳米粒子 , 蛋白质

阴离子交换整体柱对蛋白质的分离与纯化

张轶华 , 杨更亮 , 张小乐 , 赵菊敏 , 蔡丽萍 , 陈义

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.03.001

分别用乙二胺、二乙胺、三乙胺将自制的以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂的整体柱修饰为弱、强阴离子交换整体柱.考察了该整体柱的性能,选择出分离蛋白质(牛血清白蛋白、溶菌酶和谷胱甘肽)的最佳实验条件,并在最佳分离条件下考察了这些蛋白质在整体柱上的色谱行为和该整体柱对纤维素降解酶的分离纯化情况.实验结果表明,该整体柱性能良好,可以实现对纤维素降解酶的快速分离与纯化.同时,实验也证明采用梯度洗脱可以实现对某些蛋白质的分离纯化.

关键词: 整体柱 , 修饰 , 离子交换色谱 , 纤维素降解酶 , 蛋白质 , 分离 , 纯化

采用高效液相色谱-质谱考察家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质的多样性

胡朝暾 , 肖震 , 周熙 , 陈佳 , 陈波 , 刘中华

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2015.01050

家福捕鸟蛛( Selenocosmia jiafu)是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索,采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对粗毒多肽和蛋白质的多样性进行了分析。结果表明:家福捕鸟蛛粗毒经色谱分离后得到40多个色谱峰,经质谱鉴定得到238个多肽,且多肽的相对分子质量呈现出双峰分布,其中62.5%的多肽的相对分子质量分布在3000~4500之间,33.2%的多肽的相对分子质量分布在1000~3000之间。这种相对分子质量的分布模式不同于其他已经报道的蜘蛛粗毒中多肽的分布模式。电泳分析结果表明:除了相对分子质量在10000以下的多肽分子,粗毒在50、72和90 kD附近有3条明显的条带,粗毒电泳条带经液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定,主要是一些血蓝蛋白、钾离子通道蛋白、钙蛋白酶等。说明家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质种类丰富。

关键词: 反相高效液相色谱 , 基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱 , 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 , 多肽 , 蛋白质 , 蜘蛛粗毒 , 家福捕鸟蛛

空间微重力环境下蛋白质晶体生长的研究进展

曹慧玲 , 马晓亮 , 郭云珠 , 卢慧甍 , 解旭卓 , 尹大川

材料导报

空间微重力环境可消除或减弱常重力场下溶液中存在的对流和沉降,为蛋白质晶体生长提供一个相对均一和稳定的环境,有利于得到尺寸更大、衍射分辨率更高的蛋白质晶体.通过对这些高质量空间晶体进行X射线衍射分析,可获得多种蛋白质的精细三维结构.从空间蛋白质晶体生长的发展历史、研究成果、生长机理、存在的问题与对策等方面总结了空间微重力环境下蛋白质晶体生长的研究进展,展望了空间蛋白质结晶的未来.

关键词: 微重力 , 蛋白质 , 晶体生长 , 晶体质量 , 衍射分辨率 , 结构生物学

强磁环境下的生物大分子结晶研究

耿利强 , 尹大川 , 卢慧甍 , 韩王超 , 张卫菊 , 罗慧敏 , 商澎

材料导报

近年来,随着超导磁体技术的进步,围绕与强磁场条件相关的应用得到迅速发展.对结构生物学领域的研究人员来说,强磁场有望成为一种可供选择的特殊环境,用于生物大分子结晶研究,并可能成为获取高质量生物大分子晶体的一种手段.就强磁场环境对生物大分子结晶过程的影响研究进行了评述,并对该领域的未来发展方向做了预期.

关键词: 生物大分子 , 晶体生长 , 磁场 , 磁场梯度 , 蛋白质 , 结晶

利用葡聚糖和蛋白质进行超滤膜切割分子量测试对比研究

鄢忠森 , 瞿芳术 , 梁恒 , 余华荣 , 李凯 , 阳康 , 李圭白

膜科学与技术 doi:10.16159/j.cnki.issn1007-8924.2015.03.007

采用切割分子量不同的葡聚糖和蛋白质标准物质,测试了几种进口商品平板膜和国产商品中空纤维超滤膜的切割分子量.结果表明:采用葡聚糖进行切割分子量测试时,测得的切割分子量明显大于商品超滤膜厂家提供的切割分子量数据,可能原因在于葡聚糖呈链状结构,易穿过膜孔;而采用蛋白质来评价超滤膜的切割分子量时,测试的切割分子量结果较为接近商品超滤膜厂家提供的数据.在对比不同膜对相邻分子量的测试物质截留率的变化趋势后发现,不同膜的孔径分布情况存在较大差异,传统上采用的单一膜的切割分子量指标未能全面反映膜的截留效能.

关键词: 超滤膜 , 切割分子量 , 葡聚糖 , 蛋白质

医用钛表面生物活性化研究

冯波 , 翁杰 , 屈树新 , 陈继镛 , 张兴栋

功能材料

钛及钛合金具有优良的生物相容性和机械性能,已应用于临床,尤其是用作骨替换与修复材料.但是,钛属于生物惰性材料,不能与骨组织形成化学键合或称骨键合.通过表面改性可使其在生理环境具有诱导羟基磷灰石在表面自发生长的能力,即生物活性化.这是当今生物医用材料研究的热点领域之一.本文评述了钛表面生物活化的研究现状,简要总结了本课题组在这方面的研究工作.

关键词: , 生物活性 , 表面改性 , 羟基磷灰石 , 蛋白质 , 细胞

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