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蛋白质结晶条件的筛选策略研究进展

张辰艳 , 尹大川 , 鹿芹芹 , 郭云珠 , 王玺凯

材料导报

蛋白质分子的三维结构是生命科学研究中极为重要的信息,X射线单晶衍射技术是目前获得结构信息最主要的手段,但如何筛选到第一个蛋白晶体是该技术必需的第一步,也是制约结构生物学发展的主要瓶颈问题之一.现在一般通过规模筛选的方法从众多的溶液中筛选出可结晶的条件,但是工作量较大,效率也不高.回顾了近年来在提高结晶筛选效率方向取得的成就,主要表现在2个方面:一是在传统结晶方法和试剂基础上发展起来的一系列新的高效的结晶技术和筛选试剂盒;二是从生物学、物理学和化学等角度提出的一些提高结晶筛选效率的新技术,主要包括通过分子工程改造蛋白、提高蛋白溶液的稳定和均一性、导入籽晶、共结晶、改善结晶界面和变温筛选等技术.最后展望了该领域未来的发展趋势.

关键词: 蛋白质结晶 , 筛选策略 , 结晶技术 , 结晶试剂

在胶体中生长蛋白质晶体

郭云珠 , 曹慧玲 , 何进 , 崔超 , 吴子庆 , 尹大川

材料导报

介绍了在胶体中生长蛋白质晶体方法的由来,阐述了该方法的基本原理、具体实施过程及其拓展应用的进展,并进一步分析了该方法的优点与不足.最后,展望了该方法的未来发展.

关键词: 胶体 , 蛋白质结晶 , 溶质传输 , 对流 , 沉降

高通量、自动化蛋白质结晶筛选技术以及相关仪器的研究进展

梁翼然 , 祝莹 , 方群

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2016.08009

基于X射线晶体学的蛋白质结构解析主要依赖于大规模结晶条件筛选获得的高衍射分辨率的蛋白质晶体.近年来,自动化、高通量的液体操控技术和相关仪器的快速发展为蛋白质结晶筛选提供了高效、可靠的研究手段,显著推动了蛋白质结构生物学的研究.文章综述了蛋白质结晶筛选的自动化液体处理技术的发展,包括移液器、注射泵、同步纳升定量吸取注射、喷墨打印、超声喷射以及微流控等技术.文章详细介绍了各技术所对应的典型商品化仪器及其在蛋白质结晶筛选中的应用.此外,文章还介绍了集成多孔板的储存和操控、编码扫描、环境控制和软件管理等诸多功能的一体化液体操纵平台.

关键词: 自动化液体处理 , 蛋白质结晶 , 高通量筛选 , 仪器 , 综述

强迫流动环境对蛋白质结晶的影响

鹿芹芹 , 陈瑞卿 , 解旭卓 , 尹大川

材料导报

生长高质量蛋白质晶体一直是结构生物学领域的瓶颈问题之一.因此,研究蛋白质结晶方法学,提高获得高质量蛋白质晶体的几率,意义重大.强迫流动作为一种特殊的物理环境,对蛋白质溶液形核以及晶体生长过程有着显著的影响.综述了不同的强迫流动环境对蛋白质结晶过程的影响,并对影响机理进行了分析.近期的研究发现,对某些蛋白质而言,强迫流动环境有利于生长尺寸大、质量高的蛋白质晶体.

关键词: 蛋白质结晶 , 强迫流动环境 , 晶体质量

温度控制在蛋白质结晶中的应用

鹿芹芹 , 解思晓 , 马晓亮 , 陈瑞卿 , 刘永明 , 王燕 , 尹大川

材料导报

生长蛋白质晶体是X射线衍射技术解析蛋白质分子结构的主要瓶颈问题之一.影响蛋白质结晶的因素很多,其中温度是影响蛋白质结晶的重要因素,但在实践中并未受到广泛重视.总结了恒温和变温对蛋白质可结晶性和晶体质量的影响,发现温度控制既可以获得更多的蛋白质结晶条件,又可以提高蛋白质晶体质量,因此,温度控制是蛋白质结晶工作中应当考虑的重要因素.

关键词: 蛋白质结晶 , X射线衍射 , 温度

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