皮文辉
,
孙从建
,
宋志强
,
马连营
,
刘淑萍
,
白丁平
,
蔡宜东
,
刘守仁
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.06.004
采用Fractogel(R) EMD TMAE(M)强阴离子交换介质分离纯化质粒脱氧核糖核酸(DNA),该介质对质粒DNA的动态载样量达0.62 mg/mL.用Triton X-114或Triton X-100预先处理质粒DNA的裂解澄清液后,经阴离子交换色谱分离纯化获得的质粒DNA中内毒素含量分别为6.42 EU/mg和9.50 EU/mg,显著低于未经Triton处理的裂解澄清液(67.82 EU/mg).该法实现了阴离子交换色谱一步纯化质粒DNA的目的,具有简便、省时、成本低等特点.
关键词:
阴离子交换色谱
,
纯化
,
质粒DNA
,
Triton X-114
,
Triton X-100
,
内毒素
,
去除
刘建华章锦丹张晓亮李松梅于美
金属学报
doi:10.3724/SP.J.1037.2011.00804
以碱基对数为7.5 kB的大肠杆菌环状质粒DNA为模板, 通过紫外线辐射作用下的光化学反应方法制备了Ag纳米颗粒. 采用紫外--可见光吸收光谱, TEM和EDS等方法研究了辐射时间、溶液浓度等工艺条件对Ag纳米颗粒组成、形貌和结构的影响. 结果表明, 获得的Ag纳米颗粒为fcc结构, 颗粒直径为25-40 nm; 一定条件下, Ag纳米颗粒为环状, 中间孔洞直径为8-10 nm, Ag+与碱基对数摩尔比为4、辐射时间为40 min时, Ag纳米颗粒中环状结构最多.
关键词:
质粒DNA
,
photoirradiation reaction
,
nanoparticle
,
ring-shape structure
李晓玺
,
邹芹
,
杜云翔
,
李琳
,
陈玲
高分子材料科学与工程
利用阳离子淀粉制备了阳离子淀粉/质粒DNA纳米传递系统,通过凝胶电泳、激光粒度分析和原子力显微技术研究了不同取代度和N/P(氮/磷)摩尔比对传递系统复合性能和形貌特征的影响;进一步研究了DNase Ⅰ内切酶消化液、模拟体液和溶菌酶溶液等不同模拟体内环境对阳离子淀粉/质粒DNA传递系统稳定性的影响规律,并考察了阳离子淀粉与质粒DNA复合性能随细胞内涵体pH变化的规律.结果显示,较高N/P比和阳离子取代度下的阳离子淀粉/质粒DNA传递系统复合性更好,抗DNase Ⅰ和抗溶菌酶能力更强,且质粒DNA传递系统能够抵御pH=1.2的酸性环境,而在pH=4.0和pH=7.4的环境下N/P摩尔比＞5时,能保护质粒DNA使其不被酸性环境破坏.
关键词:
阳离子淀粉
,
质粒DNA
,
纳米传递系统
,
N/P摩尔比
,
稳定性
刘建华
,
章锦丹
,
张晓亮
,
李松梅
,
于美
金属学报
doi:10.3724/SP.J.1037.2011.00804
以碱基对数为7.5 kB的大肠杆菌环状质粒DNA为模板,通过紫外线辐射作用下的光化学反应方法制备了Ag纳米颗粒.采用紫外-可见光吸收光谱,TEM和EDS等方法研究了辐射时间、溶液浓度等工艺条件对Ag纳米颗粒组成、形貌和结构的影响.结果表明,获得的Ag纳米颗粒为fcc结构,颗粒直径为25-40 nm;一定条件下,Ag纳米颗粒为环状,中间孔洞直径为8-10 nm,Ag+与碱基对数摩尔比为4、辐射时间为40 min时,Ag纳米颗粒中环状结构最多.
关键词:
质粒DNA
,
光化学反应
,
纳米颗粒
,
环状结构
刘晓非
,
李琳
,
宋琳
,
肖梅
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2007.08.009
研究了低分子量壳聚糖及其O-羧甲基壳聚糖和O-羟乙基壳聚糖在不同质量分数和作用时间下,对大肠杆菌质粒DNA(pBR322 和 pUC18)的体外结合能力.研究结果表明,原料壳聚糖对2种质粒都有较强而稳定的结合能力;其2种衍生物对质粒的作用效果受空间位阻效应和氨基基团数量的共同影响,在适当的质量分数(≥1×10-2)和相对分子质量(2 000,5 000,8 000及以上)的条件下,对质粒DNA都具有很强的结合能力.研究表明,壳聚糖及其衍生物对DNA的结合是基于正负电荷的静电吸引作用,结合过程短暂,结合能力不受作用时间的影响.相对分子质量为3 000～5 000的原料壳聚糖和O-羧甲基壳聚糖均可以有效阻碍mRNA的复制,且O-羧甲基壳聚糖在同等条件下影响作用较大,推测是由于此种衍生物对氨基的质子化能力较大和体积庞大造成.大肠杆菌体内转化实验表明,壳聚糖和O-羧甲基壳聚糖不仅可以和DNA结合而使之不能转化,而且可以直接阻碍正常质粒DNA向大肠杆菌的转化过程.
关键词:
壳聚糖
,
壳聚糖衍生物
,
结合能力
,
质粒DNA
,
mRNA
王潇
,
马秋峰
,
靳根明
,
李文建
,
张红
,
周利斌
,
毛淑红
,
邱嵘
,
刘兵
原子核物理评论
doi:10.3969/j.issn.1007-4627.2005.02.010
利用能量为7. 2 MeV/u氖离子束辐照体外质粒DNA: pUC18, 采用恒场凝胶电泳结合多功能荧光成像系统研究了pUC18双链断裂片段的分布. 证实了双链断裂片段分布的非随机性, 结果还发现DNA断裂后片段的交联现象, 而且交联片段的分布也是非随机的.
关键词:
重离子
,
DNA双链断裂
,
非随机分布
,
质粒DNA
