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金属螯合膜的制备及其对木瓜蛋白酶的分离纯化

何智妍 , 聂华丽 , 周毓婷 , 朱利民

膜科学与技术 doi:10.3969/j.issn.1007-8924.2009.05.016

制备了一种能有效分离纯化木瓜蛋白酶的金属螯合膜.该膜以包裹壳聚糖的尼龙膜为基质,通过环氧氯丙烷交联活化、亚氨基二乙酸偶联、金属镍离子螯合制备得到.研究了吸附时间、溶液的pH、溶液的离子强度等因素对吸附的影响,考察了吸附模型,并对其色谱性能和再生性进行探讨.结果表明,最佳吸附条件pH 10.0,反应时间60 min,离子强度0 mol/L,吸附量达67.2 mg/g,吸附行为满足Freundlieh等温吸附模型,其色谱过程中的洗脱剂为1.0 mol/L NaSCN的Tris-HCI(pH5.0)其纯化倍数可以达到19.1倍.吸附洗脱实验重复3次,吸附率仪降低8.7%,表明该模具有良好的稳定性,重复性和再生性,能有效用于木瓜蛋白酶的分离.

关键词: 金属螯合膜 , 吸附 , 木瓜蛋白酶 , Ni2+

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