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单分散大孔亲水弱阳离子交换填料的制备及其对鱼精蛋白的分离纯化

杨春霞 , 周晶 , 龚波林

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.02.012

以自制的5.0 μm单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA/EDMA)微球为基质,对其表面进行化学改性,合成弱阳离子交换色谱填料(WCX).详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能、表面亲水性能、稳定性和重现性以及流速对蛋白保留的影响.实验结果表明,该色谱填料对蛋白的分离性能、重现性及稳定性良好;在流速为3 mL/min 时,采用线性梯度洗脱,6 min内可分离4种标准碱性蛋白质,以溶菌酶测定的该填料的动力学吸附容量为29.86 mg/g.将其用于鱼精蛋白的分离纯化,经反相高效液相色谱测定纯化后鱼精蛋白的纯度为99.2% ;与商品Shodex IEC SP-825强阳离子交换色谱柱比较,纯化结果几乎一样.

关键词: 单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球 , 弱阳离子交换填料 , 蛋白质纯化 , 鱼精蛋白

鱼精蛋白-核酸适配体-金纳米技术快速检测牛奶中的卡那霉素

贾向阳 , 尤慧艳 , 付秀丽

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2016.10007

基于聚阳离子鱼精蛋白与带负电的核酸适配体以及金纳米粒子之间的静电作用,发展了一种生物纳米检测技术,用于卡那霉素的检测;优化了缓冲溶液中阳离子、鱼精蛋白以及核酸适配体浓度,结果表明在20 mmol/L Na+、1 mmol/L Mg2+、2 mg/L 鱼精蛋白、100 nmol/L 核酸适配体条件下,卡那霉素在5~5 000 nmol/L 范围内与金纳米粒子的吸光度比值呈现良好的线性关系,相关系数(R2)为 0.992 8,方法的检出限为0.53 nmol/L.在此实验条件下,检测了牛奶中卡那霉素的含量,回收率为96%~98%,相对标准偏差为1.5%~3.2%.该方法选择性高,灵敏度好,线性范围广,显示出其应用于食品中卡那霉素检测的优势.

关键词: 鱼精蛋白 , 核酸适配体 , 金纳米粒子 , 纳米生物 , 卡那霉素 , 牛奶

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