宋子凤
,
张庆林
,
张养军
,
秦伟捷
,
钱小红
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.02006
利用原子转移自由基聚合法制备了鳞片状聚合物修饰的硅胶填料,将其作为一种新型的固定化酶载体,实现了蛋白酶的高密度固定,从而明显缩短了复杂蛋白质样品的酶解时间.使用标准蛋白质对固定化酶的酶解效率进行了考察,结果表明:鳞片状聚合物修饰的新型固定化酶硅胶填料具有较高的酶解效率,酶解标准蛋白质1 min 后,鉴定到肽段的氨基酸序列覆盖率可达95％以上.将该固定化酶硅胶填料成功应用于大肠杆菌全蛋白质的酶解,从2 min酶解肽段的混合物中鉴定到的蛋白质数量超过同样条件下溶液酶解12h的结果.另外,该固定化酶硅胶填料可以重复使用,其酶解效率具有良好的稳定性和重现性；该固定化酶具有较好的样品回收率,因而可以应用于蛋白质组学研究中.
关键词:
原子转移自由基聚合反应
,
鳞片状聚合物修饰硅胶
,
制备
,
胰蛋白酶固定
,
蛋白质组学
